Glucosae 5

Glucosae 5

Раздел: 

КЛИНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ

Параметры: 

Глюкоза

Подраздел: 

Субстраты

Кат. Номер: 

2-202

Фасовка: 

720 мл

Документация: 

ДИАГНОСТИЧЕСКИЙ НАБОР ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ГЛЮКОЗЫ

Глюкоза является простым шестиуглеродным сахаром. Благодаря еѐ окислительному метаболизму, клетки получают большинство своей энергии. Уровень глюкозы в крови контролируется несколькими гормонами. Повышенный уровень глюкозы является типичным проявлением сахарного диабета. Неправильный уровень глюкозы (гипер- либо гипогликемия) может быть также вызвано заболеваниями печени, щитовидной железы, надпочечников или опухолью поджелудочной железы.

ПРИНЦИП МЕТОДА

Кoлориметрический, энзиматический метод с оксидазой глюкозы.

GOD

глюкоза + H2O + O2 -> глюконат + H2O2

POD

2 H2O2 + фенол + 4- аминоантипирин -> 4-(п-бензохинономоноимино)- феназон + 4 H2O (красная окраска)

Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации глюкозы.


РЕАКТИВЫ

Упаковка

Liquick CorGLUCOSE
mini
Liquick CorGLUCOSE
30
Liquick CorGLUCOSE
60
1-GLUCOSE 2 x 60 мл 6 x 30 мл 6 x 60 мл
2-STANDARD 1 x 1 мл 1 x 2 мл 1 x 2 мл
Liquick CorGLUCOSE 120 Liquick CorGLUCOSE 500
1-GLUCOSE 6 x 120 мл 4 x 500 мл
2-STANDARD

2-STANDARD эталонный раствор глюкозы: 5,5 ммоль/л
(100 мг/дл).


Приготовление и прочность рабочего раствора

Реактив готов к употреблению.

Реактивы, хранящиеся при температуре 2-8 С сохраняют свою важность до даты срока годности, указанной на упаковке. Реагенты на борту аппарата при температуре 2-10ºC стабильны 8 недель. Хранить от загрязнений!

Концентрация ингридиентов в рабочем растворе

  • фосфатный буфер (pH 7,0) 250 ммоль/л
  • фенол 5 ммоль/л
  • оксидаза глюкозы (GOD) >250 мккат/л
  • пероксидаза (POD) >20 мккат/л
  • 4-аминоантипирин 500 мкмоль/л


Предупреждения и примечания

  • Использовать только для анализов in vitro.
  • Реактив действительный, если коэффициент поглощения рабочего раствора не выше 0,300 (измерение относительно дистиллированной воды при длине волны 500 нм в кювете л=1см при температуре 25ºС.)

ДОПОЛНИТЕЛЬНОЕ ОБОРУДОВАНИЕ

  • автоматический биохимический анализатор либо фотометр, позволяющий снимать показания при длине волны 500 нм (Hg 546 нм);
  • термостат на 37ºC;
  • 5% трихлоруксусная кислота (ТСА) для определения глюкозы в полной крови.
  • общее оборудование лабораторное;

ПРОБЫ

Сыворотка либо плазма крови, взятой на EDTA или гепарин (соли литиевая, натриевая либо аммониевая) без следов гемолиза; полная кровь; спинномозговая жидкость.

Материал, который не исследуется сразу же по взятию, можно хранить в пробирках, содержащих фторид либо иодоацетатнатрия. Эти соединения тормозят гликолиз и стабилизируют уровень глюкозы. Определение в спинномозговой жидкости необходимо проводить сразу же по взятию пробы.

Сыворотка и плазма могут храниться 3 дня при температуре 2-8 С.

Тем не менее рекомендуется проведение определений на свежем биологическом материале!


ПРОЦЕДУРА

Набор предназначен как для мануального определения, так и для определений при помощи автоматических анализаторов. Программы для анализаторов предоставляем на желание клиентов.

Определение мануальное

длина волны 500 нм (Hg 546 нм)

температура 20-25ºC / 37 C

кювета 1 см

  • сыворотка, плазма, спинномозговая жидкость
    В кювету поместить:
    образец
    холостой
    (ОХ)
    образец
    исследуемый
    (ОИ)
    образец
    стандартный
    (ОС)
    1-GLUCOSE 1000 мкл 1000 мкл 1000 мкл

    Подогреть до температуры определения. Затем добавить:

    стандрт 10 мкл
    исследуемый
    материал
    10 мкл

    Тщательно перемешать, инкубировать 5 минут при температуре 37ºC либо 10 минут при температуре 20-25ºС. Отчитать коэффициент поглощения образцов стандартных А(ОС) и образцов исследуемых А(ОИ) относительно образца холостого (ОХ).

  • полная кровь.
    Приготовление образцов: смешать 0,5 мл 5% трихлоруксусной кислоты (ТСА) и 50 мкл полной крови. Отцентрифугировать, собрать супернатант. Так же подготовить стандарт.

В кювету поместить:

образец
холостой
(ОХ)
образец
исследуемый
(ОИ)
образец
стандартный
(ОС)
1-GLUCOSE 1500 мкл 1500 мкл 1500 мкл

Подогреть до температуры определения. Затем добавить:

стандарт
(супернатант)
100 мкл
кровь
(супернатант)
100 мкл

Тщательно перемешать, инкубировать 5 минут при температуре 37ºC либо 10 минут при температуре 20-25ºС. Отчитать коэффициент поглощения образцов стандартных А(ОС) и образцов исследуемых А(ОИ) относительно образца холостого (ОХ).

Расчёт результатов

концентрация A(ОИ) концентрация
глюкозы = A(ОС)
×
стандарта

РЕФЕРЕНСНЫЕ ВЕЛИЧИНЫ

мг/дл ммоль/л
сыворотка, плазма 74 – 106 4,1 – 5,9
полная кровь 65 – 95 3,5 – 5,3
спинномозговая жидкость 40 – 70 2,2 – 3,9

Рекомендуется для каждой лаборатории разработка своих собственных норм, характеристических для локальной поппуляции.


КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА

Для внутреннего контроля качества рекомендуется для каждой серии определений приложение контрольных сывороток CORMAY SERUM HN (номер кат. 5-172) и CORMAY SERUMHP (номер кат. 5-173).

Для калибровки рекомендуется тоже использовать CОRMAYMULTICALIBRATOR LEVEL 1 (номер кат. 5-174; 5-176),LEVEL 2 (номер кат. 5-175; 5-177) либо GLUCOSE STANDARD100 (номер кат. 5-121), GLUCOSE STANDARD 300 (номер кат. 5-122).

Калибровочную кривую следует составлять каждые 8 недель, либо при каждой смене лота реагента.

ХАРАКТЕРИСТИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Ниже указанные результаты получены при помощи
автоматического анализатора Prestige 24i. В случае проведения анализа на другом анализаторе либо мануально полученные результаты могут отличаться.

  • Чувствительность: 0,5 мг/дл (0,03 ммоль/л).
  • Линейность: до 500 мг/дл (27,5 ммоль/л) при помощи автоматических анализаторов; до 400 мг/дл (22 ммоль/л)для мануального определения. Для более высоких концентраций необходимо разбавить образец 0,9% раствором NaCl, определение повторить, результат умножить на коэффициент разбавления.
  • Специфичносит / Интерференция
    Гемоглобин до 2,50 мг/дл, аскорбиновая кислота до 62 мг/л, билирубин до 20 мг/дл, триглицериды до 500 мг/дл не оказывают влияния на результаты измерений.
  • Точность
    Повторяемость
    (run to run) n=20
    Средняя
    [мг/дл]
    СКО
    [мг/дл]
    КВ
    [%]
    уровень 1 49,96 0,76 1,52
    уровень 2 161,86 5,96 3,68
    Воспроизводимость
    (day to day) n=80
    Средняя
    [мг/дл]
    СКО
    [мг/дл]
    КВ
    [%]
    уровень 1 93,19 1,50 1,61
    уровень 2 291,7 2,42 0,83
  • Сравнение метода
    Сравнение глюкозы кальция из образцов полученных на Prestige 24i (y) и на COBAS INTEGRA 400 (x) с использованием 100 образцов дало следующие результаты:

y = 1,0265x – 3,8927 мг/дл;

R = 0,9931 (R – коэффициент корреляции)

ВОЗМОЖНОСТЬ ОПЕРАТИВНОГО КОНТРОЛЯ

GLUCOSE STANDARD 100 и GLUCOSE STANDARD 300 проверяются SRM 965A референсным материалом.


УТИЛИЗАЦИЯ ОТХОДОВ

Поступать согласно местным требованиям.

ЛИТЕРАТУРA

  1. Barham P., Trinder P.: Analyst 97, 142-145 (1972).
  2. Kaplan L.A., Pesce A.J.: Clinical Chemistry. Theory, analysis and correlation, The C.V. Mosby Company, St. Louis (1989).
  3. Kaplan L.A., Pesce A.J., ed. Chemistry Theory, Analysis, and Correlation, 3rd ed. St Louis, MO: Mosby, 635 (1996).
  4. Tietz N.W., ed. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders, 268-272 (1995).
  5. Burtis C.A., Ashwood E.R., ed. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders, 959, 968 (1994).
  6. Dembińska-Kieć A., Naskalski J.W.: Diagnostyka laboratoryjna z elementami biochemii klinicznej, Volumed, 24-25, (1998).
  7. Burtis C.A., Ashwood E.R., ed. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. Philadelphia, PA: WB Saunders, 776-777, 1815, (1999).



Источник: cormay.ru


Добавить комментарий